冰玉栓是根據(jù)中醫(yī)驗(yàn)方及現(xiàn)代藥效學(xué)理論而研制的新藥，由*、硼砂、玄明粉等藥味組成，臨床上用于治療細(xì)菌性宮頸炎、子宮炎．療效甚好。本實(shí)驗(yàn)采用理化試驗(yàn)和GC法鑒別方中玄明粉、硼砂、*；采用GC法測(cè)定*的含量。以控制該制劑的質(zhì)量。

1 試藥與儀器

1．1 試藥：冰玉栓自制。*對(duì)照品：由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供(批號(hào)：743 8802)。其他試劑均為分析純。

I．2 儀器：GC一9A氣相色譜儀(日本島滓)，F(xiàn)ID檢測(cè)器，C-RA數(shù)據(jù)處理機(jī)。

2 鑒別實(shí)驗(yàn)

2．1 取本品10粒，置三角燒瓶中，加水20mL，水浴回流10min，置冰水浴中冷卻5min，濾過．分取濾液2mL，加氯化鋇試液1～2滴，即生成白色沉淀．沉淀在鹽酸中不溶解：l5月性樣品無干擾。

2 2 取上述剩余的濾液，加鹽酸使成酸性后，點(diǎn)于姜黃試紙上使?jié)駶?rùn)，即顯橙紅色．放置干燥，顏色變深，再置氨氣中熏。變?yōu)榫G黑色。陰性樣品無干擾。

2．3 取[含量測(cè)定]項(xiàng)下的供試品溶液，另取*對(duì)照品適量。加醋酸乙酯制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照氣相色譜法(中國(guó)約典2000年版一部附錄VIE)，色譜條件同含量測(cè)定。分別吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液適量，注入氣相色譜儀。供試品色譜中，有與對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜峰。陰性樣品無干擾。

3 含量測(cè)定

3 1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以聚乙二醇(PEG)20M為固定液。涂布濃度為10％ 。柱長(zhǎng)2m，柱溫為115℃。汽化250℃。載氣(N)流速為5ml/min ，氫氣5ml/min，空氣450mil/min ，量程103 ，衰減2，紙速1。按《中國(guó)藥典》20()0年版一部附錄VIE測(cè)定，*與內(nèi)標(biāo)物萘可得到分離(分度度大于1.5)。理論板數(shù)按萘峰計(jì)算，應(yīng)不低于2500。

3 2 校正因子的測(cè)定 取萘約60mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取*對(duì)照品約12mg，精密稱定，置l0mL量瓶中，精密加人內(nèi)標(biāo)溶液2ml。用醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，取lμL注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子。

3．3 線性試驗(yàn)

3．3．1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：取*對(duì)照品100mg，精密稱定，置25mL量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻。(每1mL含*4mg)

3．3．2 內(nèi)標(biāo)溶液的配制：取萘150mg，置25mL量瓶中醋酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻。(每1mL含萘6mg)

3．3．3 線性試驗(yàn)：分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，置于10mL量瓶中，各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2mI，加醋酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，分別取lμL，注入氣相色譜儀，測(cè)定。*的總峰面積(龍腦峰與異龍腦峰面積之和)與內(nèi)標(biāo)物萘峰面積之比(y)與相應(yīng)濃度之比(x)的線性回歸方程為：Y=0.78675X一0．0434 r=0.9999， =5。*在0.4～2.0μg/mL 濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3．4 空白試驗(yàn)：取不含*的陰性樣品(空白對(duì)照)約2g，加醋酸乙酯10mL，自“超聲處理l0min后”起，照樣品測(cè)定方法操作測(cè)定。結(jié)果：空白樣品色譜中，在與*峰和萘峰相同的保留時(shí)間處無色譜峰，即空白樣品無干擾。

3．5 精密度試驗(yàn)：取同一樣品溶液，進(jìn)樣5次，測(cè)得*總峰面積與內(nèi)標(biāo)(萘)峰面積比值的平均值為0.6600，RSD 為111％ ( =5)。

3．6 穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一樣品溶液，于0，1，2，4，6h分別進(jìn)樣，測(cè)得*總峰面積與內(nèi)標(biāo)物(萘)峰面積比值的平均值為0.6613，RSD 為1.17％( =5)。

3．7 重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品6份，照樣品測(cè)定方法操作，測(cè)定，6份樣品的平均含量為0.745％ ，RSD 為1. 41％( n=6)。

3．8 加樣回收試驗(yàn)：取已知含量的樣品約1g，精密稱定，置具塞試管中，加*對(duì)照品約6mg，精密稱定，精密加內(nèi)標(biāo)溶液2mL，加醋酸乙酯8mL，“超聲處理10min后”起，照樣品測(cè)定方法操作測(cè)定，結(jié)果，平均加樣回收率為100.81％ ，RSD=1.33％(n=5)

3．9 供試品溶液的制備與測(cè)定 取本品約2g，精密稱定，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2mL，再加醋酸乙酯8mL，密塞，超聲處理10min后，置冰水浴中冷卻5min，離心，取上清液1μL，注入氣相色譜儀，測(cè)定，內(nèi)標(biāo)法定量計(jì)算。

4 討論

    本實(shí)驗(yàn)以醋酸乙酯為溶劑，超聲處理l0min可*溶解*和基質(zhì)，再置冰水浴中冷卻，降低基質(zhì)在溶劑中的溶解度，以減少基質(zhì)對(duì)色譜柱的污染。

來源：東方醫(yī)藥網(wǎng)